申请号:200910098398.6

公开（公告）号:101558742B

分类号: A01H   4/00

主分类号:A01H   4/00

名称:一种茶花愈伤组织再生植株的方法

公开（公告）日:2012.11.21

申请日:2009.05.12

　　摘要:本发明主要涉及一种茶花愈伤组织再生植株的方法，按以下步骤进行：剥去山茶花果实种子的内外种皮，接种在１／２ＭＳ培养基上；无菌苗长至３厘米以上时，将小植株幼嫩叶片和茎段接种在愈伤组织诱导培养基上，愈伤组织诱导培养基为ＭＳ＋０．５ｍｇ·Ｌ↑［－１］６－ＢＡ＋１．０ｍｇ·Ｌ↑［－１］２，４－Ｄ；愈伤组织长至直径为１厘米大小时，转移至愈伤组织分化培养基上，愈伤组织分化培养基为ＭＳ＋ｍｇ·Ｌ↑［－１］６－ＢＡ２０＋０．１ｍｇ·Ｌ↑［－１］ＩＢＡ＋ｍｇ·Ｌ↑［－１］ＫＴ０．１；不定芽长至０．５ｃｍ时进行分离，壮芽培养基为ＭＳ＋０．２ｍｇ·Ｌ↑［－１］６－ＢＡ＋０．０５ｍｇ·Ｌ↑［－１］ＮＡＡ；当芽条长至４－５ｃｍ时，切掉芽条基部，以１０００ｇ·Ｌ↑［－１］的ＩＢＡ浸泡芽条的基部，然后接种在ＭＷ＋０．２ｍｇ·Ｌ↑［－１］ＩＢＡ＋０．２ｍｇ·Ｌ↑［－１］ＮＡＡ的培养基上。本发明的有益效果是：本发明培养基配方简单，操作工艺简便，培养时间短，再生频率高，扩繁系数大，有利于大规模生产珍稀山茶花植株及实现外源基因的遗传转化。

主权项:一种茶花愈伤组织再生植株的方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：　（１）将山茶花果实用自来水冲洗干净，再用洗衣粉浸泡１０分钟，自来水冲洗；然后转移到无菌超净台上去除果皮后，用体积比为７５％的乙醇表面消毒３０秒，无菌水冲洗２遍，用重量比为０．１％的ＨｇＣｌ↓［２］中浸泡１５－２０分钟，无菌水冲洗５－６遍；　（２）剥去种子的内外种皮，接种在１／２ＭＳ培养基上；　（３）无菌苗长至３厘米以上时，将小植株幼嫩叶片和茎段接种在愈伤组织诱导培养基上，愈伤组织诱导培养基为ＭＳ＋０．５ｍｇ·Ｌ↑［－１］６－ＢＡ＋１．０ｍｇ·Ｌ↑［－１］２，４－Ｄ；　（４）愈伤组织长至直径为１厘米大小时，转移至愈伤组织分化培养基上，愈伤组织分化培养基为ＭＳ＋ｍｇ·Ｌ↑［－１］６－ＢＡ２０＋０．１ｍｇ·Ｌ↑［－１］ＩＢＡ＋ｍｇ·Ｌ↑［－１］ＫＴ０．１；　（５）不定芽长至０．５ｃｍ时进行分离，壮芽培养基为ＭＳ＋０．２ｍｇ·Ｌ↑［－１］６－ＢＡ＋０．０５ｍｇ·Ｌ↑［－１］ＮＡＡ；　（６）当芽条长至４－５ｃｍ时，切掉芽条基部，以１０００ｇ·Ｌ↑［－１］的ＩＢＡ浸泡芽条的基部，然后接种在ＭＷ＋０．２ｍｇ·Ｌ↑［－１］ＩＢＡ＋０．２ｍｇ·Ｌ↑［－１］ＮＡＡ的培养基上。

申请（专利权）人:中国林业科学研究院亚热带林业研究所

发明（设计）人:李纪元;范正琪;李辛雷;田敏

法律状态:有效